En raison notamment de l’augmentation de la consommation de produits à base de plantes à l’échelle mondiale, on a observé une forte augmentation du nombre de rapports d’interactions in vitro et in vivo entre des compléments alimentaires et des médicaments sur ordonnance qui sont métabolisés par les enzymes du cytochrome P450 (CYP).

Des produits populaires comme le ginseng, le palmier nain et le millepertuis ont démontré une puissante inhibition ou induction in vitro de l’activité du CYP. Bien que les rapports sur les interactions in vivo ne soient pas aussi nombreux, des produits naturels tels que l’ail, l’hydraste et le jus de pamplemousse ont montré qu’ils pouvaient affecter l’activité du CYP in vivo. L’utilisation répandue des plantes médicinales et des médecines alternatives se poursuivant, une sensibilisation accrue de la part de la communauté scientifique et médicale devrait permettre une utilisation plus sûre de ces produits à l’avenir.

Les produits ont été broyés dans un mortier, si nécessaire, et dissous dans de l’eau et du DMSO 80/20 pour l’extraction. La dose quotidienne recommandée de chaque préparation fongique a été prise comme base pour toutes les extractions. Ces concentrations in vitro sont censées couvrir la gamme des concentrations présentes dans l’intestin grêle et le sang in vivo. Toutes les solutions mères de champignons ont été conservées à 4°C, en évitant la lumière.

Des microsomes de foie humain (0,25 mg/ml) ont été incubés dans des plaques 96 puits séparées pendant 15 minutes à 37° C dans un tampon phosphate de potassium 0,1 mM (pH 7. 4) contenant chaque substrat de sonde respectif Testostérone à 50 μM pour le CYP3A4, dextrométhorphane à 10 μM pour le CYP2D6 et diclofénac à 20 μM pour le CYP2C9) et un système régénérateur de NADPH (1,25 mM NADP +, 3,3 mM glucose-6-phosphate, 3,3 mM MgCl 2 et 0,4 U/ml glucose-6-phosphate déshydrogénase). Les extraits de champignons ont été dissous dans du DMSO/eau (20/80) et ont été ajoutés dans des volumes de 2 μl. L’inhibiteur de contrôle positif (kétoconazole pour le CYP3A4, quinidine pour le CYP2D6 et sulfafénazole pour le CYP2C9 ) ont été dissous dans du DMSO/eau (20/80) et ont été ajoutés dans des volumes de 2 μl. Toutes les incubations ont été réalisées dans du DMSO à 0,2 %. Le volume total d’incubation était de 200μl. La réaction a été terminée par l’ajout de 90 μl d’acétonitrile. La formation de produits réactionnels spécifiques (6-bêta-hydroxy-testostérone, dextrorphane et 4′-hydroxy-diclofénac) a été suivie par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse comme décrit précédemment.

Comme cela a été démontré précédemment à partir d’une comparaison brute de la puissance d’inhibition in vitro et de l’ampleur des interactions médicamenteuses, dans presque tous les cas, si la puissance d’inhibition était ≤1 μM, une interaction médicamenteuse in vivo serait observée ; cependant, si la puissance d’inhibition était ≥10 μM, il existe toujours une faible possibilité que le médicament provoque une interaction. Par conséquent, les compléments alimentaires à base de champignons évalués dans ce travail présentent une faible possibilité de présenter des interactions médicamenteuses in vivo par inhibition du CYP450.